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2022.12.17 还不会 WB 实验?一文读懂 WB 实验步骤

提起生物医药实验,就不得不提 WB 实验了。WB实验常被科研人称为玄学实验,易学难精。丁香实验在此对 WB 实验进行总结,特地推出「WB 实验」专题,点击下方...电泳槽。配制上样的样品,100℃ 金属浴 15min,上样,上 marker,60V 电泳,跑过浓缩胶后可加到 120V,跑至底层后可停止。4. 转膜取适宜大小的

2024.07.02 Actin 不灵了?PNAS 告诉你为什么做 WB 一定要跑双内参

✦•✦做 WB 的同学都知道用 Actin 条带作为内参来反映 WB 实验的上样量和结果的可靠性,可你是否知道, Actin 在一些... inhibitors in melanoma 的论文通过大量 WB 「双内参」来精准检测 AMBRA1 和 FAK1 的蛋白表达水平,以确保实验结果的准确性和可重复性

2023.04.02 盘点 10 个常用 WB 内参

混迹实验圈,可以熟练操作 WB 的你,是不是一说内参就想到 beta-actin,甚至有的同学会把 beta-actin 当做全部内参的代名词... S 期表达,因此对于非增殖细胞不推荐使用。第三,确定表达因素选择表达不受实验变量影响的内参,例如,细胞应激反应中 HSP60 会表达上调,因此在研究细胞应激实验

2022.04.19 崩溃!磷酸化蛋白 WB 太难了,踩坑无数后我总结了这 7 条

蛋白磷酸化,是蛋白激酶在靶蛋白的氨基酸残基上添加磷酸基团的一种可逆的翻译后修饰,也是信号转导研究绕不开的话题。WB 难,一入 WB 深似海,磷酸化蛋白的 WB...。07 检测总蛋白含量为确定 WB 上信号的缺失是由于磷酸化效率低还是磷酸化蛋白分离不充分,同时需要检测总蛋白含量。例如,使用配对抗体检测磷酸化和未修饰的蛋白
Stuart L. Weinstein

2015.03.18 Stuart L. Weinstein

Stuart L. Weinstein, MDIgnacio V. Ponseti Professor of Orthopaedic... Orthopaedic Association (Great Britain, Australia, New Zealand), 1985A.R. Shands

2022.12.01 1小时!讲清 WB 实验的全过程(内含技巧)

,洗去残留的电转液(五) 封闭弃去 TBST 液,5% 脱脂牛奶浸泡 1 h,60 r/min(六) 抗体孵育加一抗:将 PVDF 膜用 TBST 液浸洗... PVDF 膜,放入冰箱,4°C 过夜;加二抗:1. 过夜后取出,将抗体孵育袋放到摇床上恢复室温30 min,60 r/min,回收一抗2. 将 PVDF 膜

2024.09.25 2024 新规!含 WB 数据的文章投稿必看,又一学术大佬因它撤稿翻车

对于很多生化科研人而言,蛋白质印迹法(Western blotting,WB)可能是其使用最广泛的技术之一。每个人或多或少都有点 WB 血泪史,总有一段被 WB 弄得欲哭无泪的黑暗时光。今年,WB 迎来了第 45 个生日,正值壮年、坐拥蛋白质研究技术的「头把交椅」 的它毁誉参半,爱它者甘之如饴,恨它者批评质疑。WB

2022.10.24 崩溃!WB 又要从头再来,踩坑无数的我总结了这 5 点

常听初到实验室的师妹哀叹:WB 实验又双叒失败了!!走过最长的路,就是 WB 实验的弯路,掉的最深的坑就是 WB 的坑。<<< 向左滑动下图... >>>WB 作为研究领域的常客,不仅新手闻之落泪,就连实验大佬都时常觉得其中暗藏「玄学」,如何才能像开挂般事半功倍完成每一次 WB 实验呢
综述——膜性肾病中的抗 PLA2R 抗体的十年进展

2020.04.10 综述——膜性肾病中的抗 PLA2R 抗体的十年进展

继发性膜性肾病。其余 70% 的患者,未发现根本原因,因此被称为原发性(特发性)膜性肾病。2009 年 M 型磷脂酶 A2 受体(PLA2R)的发现,极大地推动了基础和临床研究。原发性膜性肾病(MN)被认为是一种肾脏受限的自身免疫性疾病,70%~80% 的患者中发现有针对 PLA2R 的抗体(aPLA2Rab),2

2023.03.12 WB 定量不准确?问题竟然出在内参上!

师弟上午 10:00求救师姐!我跑 WB 每次蛋白表达趋势咋都跟理论不符呢?选的哪个内参蛋白呀?组织缺氧,选的 GAPDH 做内参,按理目的蛋白表达应该...,对实验结果大有影响的,要提前做好功课才行哦我们 WB 蛋白表达结果真的可靠吗?明明大量文献已经报道了目标蛋白的表达情况,但在同样的条件下就是无法重复。一次常规

2023.03.13 实验做到崩溃?这 10 个技巧让做出发表级 WB

做了一年多的实验,终于把实验做完了。最近文章也写得差不多了,美滋滋地选选投哪个杂志好点。等师弟把最后的 WB 图发给我就赶紧投稿,今年毕业有望!师兄师弟,WB 结果出来了吗?文章就差你的 WB 图了师弟师兄,你看这个图,感觉又失败了,还要继续摸索体系。师兄实验摸索半个月了,怎么做得还这么烂?师弟唉,检测组织里的蛋白
2013年度“科技奥斯卡”R&D100大奖揭晓

2013.07.17 2013年度“科技奥斯卡”R&D100大奖揭晓

近日,2013 年度(第 51 届)R&D 100 大奖(R&D 100 Awards)的名单揭晓。新材料、生命科学、电子仪器...,其中赛默飞世尔有5个产品获奖,可谓大赢家。R&D 100 大奖被誉为“科技奥斯卡”,是国际科技

2022.12.06 半小时,讲清 WB 实验鉴定外泌体!(值得收藏)

和大家一起学习,采用 WB 实验鉴定外泌体的关键步骤。一、外泌体是什么?外泌体是直径约为 30-200nm,密度在 1.13-1.21g/mL 的小囊泡,其天然...待测样品 25μL 加入到 96 孔板中;取 200μL 的 BCA 工作液于 96 孔板中,37° 孵育 30 min;多功能酶标仪测定
R0 切除可延长结肠癌肝转移患者生存期

2015.09.29 R0 切除可延长结肠癌肝转移患者生存期

1992~2012 期间 2626 例接受肝切除的 CRLM 患者,排除标准包括再次肝切除术、R2 切除(肉眼可见肿瘤残留的不完整切除)等。研究者采用高分辨组织学距离测量法对切缘宽度进行测量,并将患者分为四组: 0 mm 组(R1 切除,切缘阳性)、0.1-0.9 mm 组、1-9 mm 组及 ≥ 10 mm 组(R
华莱士 A.R.简介

2009.02.09 华莱士 A.R.简介

博物学家艾尔弗雷德-拉塞尔-华莱士华莱士,Alfred Russel Wallace (1823~1913),英国博物学家,进化论者,与C.R.达尔文共同...”,已表现出明确的进化观点,但对进化机制尚一无所知。1858年2月,他在南洋的马六甲岛患疟疾中,思考人类进化问题,想起所读过的T.R.马尔萨斯

2012.05.21 患者,男,60岁,突然的发热加重!

病史特点:收治病人一名,基本情况如下:患者,男,60岁,因咳嗽,咯痰7天,加重伴发热2天入院。患者入院前7天,因受...左右波动。患者既往无重大疾病病史,无输血史,无食物药物史,无外伤史,无遗传病史。查体:T38.8°c P100次/分 R24次
【用药问答】发热患者腹泻2天、双腋下可见出血点、首选检查?

2023.01.03 【用药问答】发热患者腹泻2天、双腋下可见出血点、首选检查?

【用药问答】男,60岁发热乏力3天,腹胀,腹泻2天,查体T39°C,P120次/分,R22次/分,BP80/50mmHg,神志清,面部潮红,巩膜无黄染,结膜充血,双腋下可见划痕样出血点,心肺无异常,腹软,无压痛,反跳痛,肝脾肋下未触及。血常规:Hb158g/L,WBC15x10^9/L,N0.44,L0.40,异性

2011.12.05 患者,女性,60岁,一例误诊误治

病史特点:患者,女性,60岁,农民,四川人。主 诉:乏力、纳差、尿黄1周。现病史:1周前无明显诱因下出...重视,未予治疗。2天前患者乏力、纳差、尿黄症状越加明显,遂到当地卫生院就诊,查尿常规示尿潜血1+,尿胆红素100μmol/L,尿胆原66μmol/L
NA10L 氮气发生器

2025.03.19 NA10L 氮气发生器

NA10L氮气发生器规格和参数输出流量:0-10L/min;输出压力:0-0.4Mpa压力稳定性:<0.2%氮气纯度:99%~99.999%【订制】最大功率:750W含水量露点:小于-60℃嗓音大小:约58dB运行应用:适用于24小时连续工作运行操作简单:一键式操作就能自动发生。安装环境

2011.10.28 老年女性,60岁,乳腺癌术后胸壁复发一例

病史特点:老年女性,60岁左右吧,右乳癌术后胸壁复发的。病理:浸润性导管癌。ER(+)PR(-)HER-2(-),P53(+)。现患者右侧胸壁多处破溃及大小多处结节。PET-CT示胸壁复发及多发骨转移(L2-L5及双侧髋关节)。心脏装有起搏器。因肾功不全3期未行双磷酸盐治疗及全身化疗,卡式评分:70
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