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2022.12.17 还不会 WB 实验?一文读懂 WB 实验步骤

提起生物医药实验,就不得不提 WB 实验了。WB实验常被科研人称为玄学实验,易学难精。丁香实验在此对 WB 实验进行总结,特地推出「WB 实验」专题,点击下方...电泳槽。配制上样的样品,100℃ 金属浴 15min,上样,上 marker,60V 电泳,跑过浓缩胶后可加到 120V,跑至底层后可停止。4. 转膜取适宜大小的

2023.04.02 盘点 10 个常用 WB 内参

混迹实验圈,可以熟练操作 WB 的你,是不是一说内参就想到 beta-actin,甚至有的同学会把 beta-actin 当做全部内参的代名词... S 期表达,因此对于非增殖细胞不推荐使用。第三,确定表达因素选择表达不受实验变量影响的内参,例如,细胞应激反应中 HSP60 会表达上调,因此在研究细胞应激实验

2024.09.25 2024 新规!含 WB 数据的文章投稿必看,又一学术大佬因它撤稿翻车

,引发撤稿潮,严重地损伤个人学术羽毛。近日,西安交通大学第二附属医院某团队 2018 年发表在 J Cell Biochem 杂志的论文被撤回,因为 WB 条带...对于很多生化科研人而言,蛋白质印迹法(Western blotting,WB)可能是其使用最广泛的技术之一。每个人或多或少都有点 WB 血泪史,总有一段

2022.10.24 崩溃!WB 又要从头再来,踩坑无数的我总结了这 5 点

常听初到实验室的师妹哀叹:WB 实验又双叒失败了!!走过最长的路,就是 WB 实验的弯路,掉的最深的坑就是 WB 的坑。<<< 向左滑动下图... >>>WB 作为研究领域的常客,不仅新手闻之落泪,就连实验大佬都时常觉得其中暗藏「玄学」,如何才能像开挂般事半功倍完成每一次 WB 实验呢

2022.04.19 崩溃!磷酸化蛋白 WB 太难了,踩坑无数后我总结了这 7 条

蛋白磷酸化,是蛋白激酶在靶蛋白的氨基酸残基上添加磷酸基团的一种可逆的翻译后修饰,也是信号转导研究绕不开的话题。WB 难,一入 WB 深似海,磷酸化蛋白的 WB...。07 检测总蛋白含量为确定 WB 上信号的缺失是由于磷酸化效率低还是磷酸化蛋白分离不充分,同时需要检测总蛋白含量。例如,使用配对抗体检测磷酸化和未修饰的蛋白

2022.12.01 1小时!讲清 WB 实验的全过程(内含技巧)

常有实验小白抱怨,读了各种 WB 实验技术贴,然而很少有入门级的 WB 操作方法。基于实验小白们的诉求,丁香实验特此整理了一份详细且易懂的 WB 实验操作方法,手把手教小伙伴们理解 WB 实验的全过程。一、实操详解视频如果不方便观看视频,可以先收藏订阅「WB 实验专题」哦,更多实验干货集锦,定期更新!此外,丁香实验

2023.03.12 WB 定量不准确?问题竟然出在内参上!

师弟上午 10:00求救师姐!我跑 WB 每次蛋白表达趋势咋都跟理论不符呢?选的哪个内参蛋白呀?组织缺氧,选的 GAPDH 做内参,按理目的蛋白表达应该...,对实验结果大有影响的,要提前做好功课才行哦我们 WB 蛋白表达结果真的可靠吗?明明大量文献已经报道了目标蛋白的表达情况,但在同样的条件下就是无法重复。一次常规

2023.03.13 实验做到崩溃?这 10 个技巧让做出发表级 WB

做了一年多的实验,终于把实验做完了。最近文章也写得差不多了,美滋滋地选选投哪个杂志好点。等师弟把最后的 WB 图发给我就赶紧投稿,今年毕业有望!师兄师弟,WB 结果出来了吗?文章就差你的 WB 图了师弟师兄,你看这个图,感觉又失败了,还要继续摸索体系。师兄实验摸索半个月了,怎么做得还这么烂?师弟唉,检测组织里的蛋白

2023.09.10 破案了!师姐 WB 条带漂亮,竟然是这样做的(含福利)

从导师办公室走出来的小师妹闷闷不乐。师妹师姐,我有个蛋白表达量好低,WB 总是检测不到重复性也不好,课题没进展,被老板骂了😭可以试试全自动毛细管 Digital Western 技术,对于表达量比较低的蛋白的检测灵敏度很高,你可以去试试!这个 WB 条带就是用该技术做出来的![1]师姐师妹哇,谢谢师姐,我的课题有救

2023.04.23 3 种 WB 条带分析软件,手把手教学!

Analyzer 是 WB 另外一个「好搭档」,对 WB 结果进行灰度扫描的详细教程也给大家整理好啦。「Image J处理」实验数据灰度分析最后, ImageJ 作为万能软件,常用来对于荧光、组化、细胞划痕实验进行图片结果分析,当然也可以用来统计 WB 条带?不过,关于用 Image J 量化 WB 条带灰度值,在网

2024.06.04 WB 内参 β-actin、GAPDH 也会「出错」?这一点千万注意

又是一年毕业季,师兄师姐们都着急给文章找个期刊。忐忐忑忑一个多月,文章终于有了审稿意见。好消息:没被拒,需要修;坏消息:需要修的包括 WB 实验。看似完美的 WB 条带,哪里出了问题?千辛万苦搞定了 WB 条带非特异、背景深、显色过曝……却忽略了内参的问题,甚至差点出现假阳性。除了

2024.05.17 细胞养出「鬼」,WB 跑出「山水画」……他们真是被科研耽误的艺术家

实验室是一个巨大的盲盒。对于刚接触科研的同学们,诡异结果图真的遍地开花!有的在培养皿里培养出乌龟、有的养出鬼脸,还有人跑 WB 能跑出山水画。相比之下,科研老司机们的实验结果图真的非常丝滑,专治各种不服!今天学霸君带大家盘点下 WB、PCR、细胞实验中的高手和菜鸟,你会在哪个 level?Round-1 漂亮的 WB

2023.03.22 移液器、冻干机 0 元试用!WB 全线耗材低价促销~

你们实验室那些大神每天都是怎样过的?大神晚上加班复盘实验手写了五页 WB 关键技巧,我借来消化了整整一周;大神为了赶实验进度天天连续一个月没有休息,我坚持...;—伯乐 WB 全实验流程王牌产品大促WB 作为研究领域的常客,不仅新手闻之落泪,就连实验大佬都时常栽跟头。「Western 实验的干货宝典和小窍门」伴随「伯乐

2022.12.06 半小时,讲清 WB 实验鉴定外泌体!(值得收藏)

和大家一起学习,采用 WB 实验鉴定外泌体的关键步骤。一、外泌体是什么?外泌体是直径约为 30-200nm,密度在 1.13-1.21g/mL 的小囊泡,其天然... 5 min 后上样。80V 电压下电泳 30 min 至溴酚蓝染料浓缩胶进入分离胶后将电压调制 120V 继续电泳 60 min。取 PVDF 膜在甲醇中活化

2016.01.19 WB 实战指南及正确使用 Quantity One 定量

本人做 WB 有 8、9 年了,略作整理完善拼凑成《WB 实战指南》,欢迎行家批评指正。查看详情>>
手把手教你用 PS 做出漂亮的 WB 结果图

2017.02.28 手把手教你用 PS 做出漂亮的 WB 结果图

你是否还在忧愁 western blotting 结果达不到投稿要求?下面的干货一定能帮到你,操作如此之简单,保证你一学就会,做出漂亮的 figures。打开 PS,新建画布(国际标准纸张)。将 WB 曝光原图拖入到画布中,使用参考线将条带摆正。矩形选区选择想要的条带,cltr+单击拖动到另一个新建的空白画布中
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