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2022.12.17 还不会 WB 实验?一文读懂 WB 实验步骤

提起生物医药实验,就不得不提 WB 实验了。WB实验常被科研人称为玄学实验,易学难精。丁香实验在此对 WB 实验进行总结,特地推出「WB 实验」专题,点击下方... 100 微升 BCA 液,加入 20 微升被试,每个样品重复 3 孔。避光 37℃ 30 min,于 562 nm测定,计算蛋白浓度。3. 电泳玻璃板夹好,检漏

2022.05.31 谁也不想 WB 总出错!配图详解 12 个 WB 翻车原因

经常做 western blot 的同学通常会有一种错觉这哪里是搞科研明明是搞「玄学」十个 WB 七个歪八个丑九个坏还有一个不出来要么条带失踪要么背景漆黑要么杂带丛生……有时就算凑齐天时地利人和也不一定能得到一组完美条带江湖传言:一个生物学博士,要跑满 1000 板胶才有可能毕业WB 实验

2022.05.05 马上就要做 WB 实验了,这些技巧希望你能记住

对于科研人来说,WB 和蛋白纯化都是很基础的实验,但也是容易出错的高发区域。WB 的实验流程极其繁琐,从配胶到孵育中间一个环节失误都会导致全盘皆输,如果不明白实验原理,想弄清楚失败的原因都很费劲。蛋白表达也是一样,光是选择合适的纯化标签就得耗费一番功夫。你在 WB 和蛋白纯化过程中又遇到了哪些难题?为了

2023.06.23 4 步!把「WB」胶板做的又直又漂亮

文末可领取免费科研入门教学资源WB 配胶几乎成了实验室小白的第一道磨练关卡!做得好,就能快速获得师兄师姐的赏识,学习新技能,做得不好不仅影响 WB 实验结果,可能还会浪费蛋白样本!本篇整理了4 个步骤手把手教你将 WB 胶板做的又直又漂亮,文末附上全部 WB 标准操作流程。「进阶」WB 详解(步骤、问答

2024.07.02 Actin 不灵了?PNAS 告诉你为什么做 WB 一定要跑双内参

✦•✦做 WB 的同学都知道用 Actin 条带作为内参来反映 WB 实验的上样量和结果的可靠性,可你是否知道, Actin 在一些... inhibitors in melanoma 的论文通过大量 WB 「双内参」来精准检测 AMBRA1 和 FAK1 的蛋白表达水平,以确保实验结果的准确性和可重复性

2022.12.19 速查收!15 年 WB 经验教你科研不迷路(视频教学)

科研人习惯把 WB 叫做「玄学」,一不小心很容易出现问题!明明上了两个相同体积的同个样品,可总是这两个泳道的条带趋势不一致。我们给大家准备了图解 WB 标准...不要有空隙。封闭完之后,加入抗体进行封膜处理,封膜 1 h。取出膜用 TBST 洗 3 次,每次 10 min。加入二抗进行孵育,孵育 1 h后使用 TBST

2022.12.01 1小时!讲清 WB 实验的全过程(内含技巧)

常有实验小白抱怨,读了各种 WB 实验技术贴,然而很少有入门级的 WB 操作方法。基于实验小白们的诉求,丁香实验特此整理了一份详细且易懂的 WB 实验操作方法,手把手教小伙伴们理解 WB 实验的全过程。一、实操详解视频如果不方便观看视频,可以先收藏订阅「WB 实验专题」哦,更多实验干货集锦,定期更新!此外,丁香实验
iWestern 之旅:打开 WB 新世界的大门

2020.09.30 iWestern 之旅:打开 WB 新世界的大门

确保结果准确性和可重复性,达到高水平期刊的要求。iWestern 流程一览3 个多小时就能做完一轮 WB,条带图还很漂亮?是的!来看看 iWestern 方案是如何为 WB 提效的?Step 1 蛋白定量想要把多个样品进行平行比较,测算凝胶上样量,蛋白定量必不可少。BCA 法由于灵敏度高、线性范围宽,均一性和去垢剂

2022.12.06 半小时,讲清 WB 实验鉴定外泌体!(值得收藏)

和大家一起学习,采用 WB 实验鉴定外泌体的关键步骤。一、外泌体是什么?外泌体是直径约为 30-200nm,密度在 1.13-1.21g/mL 的小囊泡,其天然...待测样品 25μL 加入到 96 孔板中;取 200μL 的 BCA 工作液于 96 孔板中,37° 孵育 30 min;多功能酶标仪测定

2024.09.04 读到即是福气 | 掌握 5 点 WB 制胶不再出错(免费试用)

离大谱,折腾两天做的 WB,看到显影结果的那一刻,人都麻了……这歪七扭八的条带,仿佛是在嘲笑我(文中有免费试用)。别人做的:我做的:为什么会出现这种结果?最大的可能是 WB 胶不均匀。你在 WB 制胶过程中是否也遇到这样或那样的问题呢,这里为你送上一份制胶 Tips!▲上下滑动查看▼1.

2023.03.13 实验做到崩溃?这 10 个技巧让做出发表级 WB

做了一年多的实验,终于把实验做完了。最近文章也写得差不多了,美滋滋地选选投哪个杂志好点。等师弟把最后的 WB 图发给我就赶紧投稿,今年毕业有望!师兄师弟,WB 结果出来了吗?文章就差你的 WB 图了师弟师兄,你看这个图,感觉又失败了,还要继续摸索体系。师兄实验摸索半个月了,怎么做得还这么烂?师弟唉,检测组织里的蛋白

2024.05.17 细胞养出「鬼」,WB 跑出「山水画」……他们真是被科研耽误的艺术家

实验室是一个巨大的盲盒。对于刚接触科研的同学们,诡异结果图真的遍地开花!有的在培养皿里培养出乌龟、有的养出鬼脸,还有人跑 WB 能跑出山水画。相比之下,科研老司机们的实验结果图真的非常丝滑,专治各种不服!今天学霸君带大家盘点下 WB、PCR、细胞实验中的高手和菜鸟,你会在哪个 level?Round-1 漂亮的 WB

2024.06.04 WB 内参 β-actin、GAPDH 也会「出错」?这一点千万注意

又是一年毕业季,师兄师姐们都着急给文章找个期刊。忐忐忑忑一个多月,文章终于有了审稿意见。好消息:没被拒,需要修;坏消息:需要修的包括 WB 实验。看似完美的 WB 条带,哪里出了问题?千辛万苦搞定了 WB 条带非特异、背景深、显色过曝……却忽略了内参的问题,甚至差点出现假阳性。除了
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