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2023.05.29 20 个蛋白 WB 转膜的条件摸索经验分享

点此领免费科研入门教学资源WB 经常出现实验结果不如意的情况,除了抗体原因,转膜恐怕是 western blot 成败的最关键因素。本文总结了 20 个分子量蛋白转膜的时间,希望对大家有用。包括蛋白来源、蛋白名称(或类型)、蛋白分子量、WB 用膜类型、孔径、转膜方式(恒压、恒流)、转膜时间。「进阶」WB 实验结果问题

2022.12.17 还不会 WB 实验?一文读懂 WB 实验步骤

提起生物医药实验,就不得不提 WB 实验了。WB实验常被科研人称为玄学实验,易学难精。丁香实验在此对 WB 实验进行总结,特地推出「WB 实验」专题,点击下方... 1.5ml 离心管,继续裂解 20min。于 4℃ 离心机离心(14000 rpm,15min),取上清,置于 -20℃ 冰箱保存。2. 蛋白含量的测定(BCA)取出
E-tag 抗体

2018.11.13 E-tag 抗体

需求,包括蛋白印迹(WB)、免疫沉淀(IP)和免疫荧光(IF)实验。选择适合您实验的 E-tag 抗体产品描述应用推荐稀释比货号E-tag 抗体,兔多抗,抗原...E-tag(氨基酸序列:GAPVPYPDPLEPR)是一种常见的表位标签之一,有 13 个氨基酸,分子量约为 1.4 KDa。通过重组 DNA 技术将

2022.03.31 3 招教你跑出干净漂亮的 WB 条带!

WB —— 科研人入门的第一个实验。很多科研小白在开始做 WB 的时候,总会出现这样那样的问题:|内参蛋白不齐|目标蛋白太淡|蛋白条带奇形怪状~|背景太脏,根本分析不出来其实,WB 做不出,一定是其中的一个环节操作不规范。第一步明确 WB 标准实验步骤常规的操作步骤包括:蛋白
如何实现 20 合一混检?华大智造 MGISTP-7000 给出答案

2022.01.21 如何实现 20 合一混检?华大智造 MGISTP-7000 给出答案

提升核酸检测的效率及能力。而这也对自动化分杯工作带来通量、效率和成功率等方面的新挑战。借「自定义转移」功能MGISTP-7000 可实现「20 合 1」混检为响应国家抗疫的最新要求,快速完成大规模人群的核酸检测工作,华大智造基于近两年的一线抗疫经验,依托全自动 MGISTP-7000 分杯处理系统紧急推出「20 合一」混检

2023.08.05 还拿不下 WB ELISA?试试这 15 个蛋白实验小技巧

点此领免费科研入门教学资源蛋白实验是基础科学研究的重中之重。从 WB 到 ELISA 再到 CHIP,每一个实验都有很多操作细节。如何配制出又直又好看的 wb 胶板?Co-IP 背景较深或者条带杂乱的可能原因是什么?Elisa 实验中怎么选择抗体?本次文章,我们汇总了 20 个蛋白实验常见问题,一定可以解决你的困扰

2023.04.02 盘点 10 个常用 WB 内参

混迹实验圈,可以熟练操作 WB 的你,是不是一说内参就想到 beta-actin,甚至有的同学会把 beta-actin 当做全部内参的代名词... LC3B(~14-17 kDa),则应避免使用 Cofilin 或 Cyclophilin B(~20 kDa)这些分子量与目标蛋白接近的内参蛋白。第二,了解

2022.12.03 收藏!如何制备 WB 实验的样品(内含技巧)?

每一个生物医学科研工作者都有一部 WB 实验血泪史,相信做 WB 的人都知道每个步骤都涉及到实验成败。在此丁香实验针对不同样品性质,整理了 3 种制备 WB 实验样品的高效方法,助力小伙伴们科研不迷路!以下所有内容都收录在「WB 实验专题」之中,大家也可以提前收藏订阅一波,内容更新不错过!一、单层贴壁细胞总蛋白的提取

2022.10.24 崩溃!WB 又要从头再来,踩坑无数的我总结了这 5 点

常听初到实验室的师妹哀叹:WB 实验又双叒失败了!!走过最长的路,就是 WB 实验的弯路,掉的最深的坑就是 WB 的坑。<<< 向左滑动下图... >>>WB 作为研究领域的常客,不仅新手闻之落泪,就连实验大佬都时常觉得其中暗藏「玄学」,如何才能像开挂般事半功倍完成每一次 WB 实验呢

2024.07.02 Actin 不灵了?PNAS 告诉你为什么做 WB 一定要跑双内参

✦•✦做 WB 的同学都知道用 Actin 条带作为内参来反映 WB 实验的上样量和结果的可靠性,可你是否知道, Actin 在一些... inhibitors in melanoma 的论文通过大量 WB 「双内参」来精准检测 AMBRA1 和 FAK1 的蛋白表达水平,以确保实验结果的准确性和可重复性

2023.08.16 WB 省抗体妙招,25ul 就能敷一抗,有手就会!

WB 实验,为分子生物学经典实验之一。常用来进行蛋白分子量估算,蛋白功能研究等实验。但是实验中,需要进行一抗、二抗及荧光底物孵育等过程。需要耗费大量抗体,如果...少,仅 500ul/20cm2 左右(即 25ul/ 平方厘米),一起来看看吧!👉 点此了解抗体节省小妙招👉 点此了解抗体节省小妙招👉 点此了解抗体

2023.06.23 4 步!把「WB」胶板做的又直又漂亮

文末可领取免费科研入门教学资源WB 配胶几乎成了实验室小白的第一道磨练关卡!做得好,就能快速获得师兄师姐的赏识,学习新技能,做得不好不仅影响 WB 实验结果,可能还会浪费蛋白样本!本篇整理了4 个步骤手把手教你将 WB 胶板做的又直又漂亮,文末附上全部 WB 标准操作流程。「进阶」WB 详解(步骤、问答

2023.03.12 WB 定量不准确?问题竟然出在内参上!

FoxP1 产生降解作用,因此在敲低E3连接酶后,FoxP1 的表达上调。那么在 WB 实验中选择不同的内参,我们会得到怎样的结果呢?通过转染 dsiRNA...,用 Stain-Free 信号进行归一化可提高 WB 数据的重现性。(A-C)分别用 dsiRNA 对照和 dsi E3 连接酶转染 BEAS-2B 细胞。裂解产物

2024.02.26 顿悟瞬间,照我这样做 WB,完美条带原图直出!

2024 年夜饭,吃了寒假,过了压岁钱,拿了新学期实验,刚开始就喊「救命」……(文中有惊喜🎁)师弟师姐,救命~ WB 显影结束...弱去垢剂 Tween- 20)•目的蛋白含量过低:(适当增加样本上样量)•抗体活性低或稀释比例不合适:(选择验证过

2022.05.31 谁也不想 WB 总出错!配图详解 12 个 WB 翻车原因

经常做 western blot 的同学通常会有一种错觉这哪里是搞科研明明是搞「玄学」十个 WB 七个歪八个丑九个坏还有一个不出来要么条带失踪要么背景漆黑要么杂带丛生……有时就算凑齐天时地利人和也不一定能得到一组完美条带江湖传言:一个生物学博士,要跑满 1000 板胶才有可能毕业WB 实验

2022.05.10 「它」笑了,我哭了,做 WB 怎么这么难呀?

科研人最怕见到的两种微笑,一个是 ddl 前导师脸上关心的微笑,还有一个是 WB 条带上出现的微笑。图片来源:丁香园论坛比如上方右侧图片中的这一个个微笑,看着让人难过。如果你经常出现微笑条带,那么最好在制胶的过程中多点耐心,保证凝固均匀大概率就能避免。除了微笑条带外,WB 的翻车情况还有很多,让人防不胜防,有诗为证

2022.12.01 1小时!讲清 WB 实验的全过程(内含技巧)

常有实验小白抱怨,读了各种 WB 实验技术贴,然而很少有入门级的 WB 操作方法。基于实验小白们的诉求,丁香实验特此整理了一份详细且易懂的 WB 实验操作方法,手把手教小伙伴们理解 WB 实验的全过程。一、实操详解视频如果不方便观看视频,可以先收藏订阅「WB 实验专题」哦,更多实验干货集锦,定期更新!此外,丁香实验
iWestern 之旅:打开 WB 新世界的大门

2020.09.30 iWestern 之旅:打开 WB 新世界的大门

确保结果准确性和可重复性,达到高水平期刊的要求。iWestern 流程一览3 个多小时就能做完一轮 WB,条带图还很漂亮?是的!来看看 iWestern 方案是如何为 WB 提效的?Step 1 蛋白定量想要把多个样品进行平行比较,测算凝胶上样量,蛋白定量必不可少。BCA 法由于灵敏度高、线性范围宽,均一性和去垢剂
浙江一美容院美白产品汞超标7000倍

2015.08.29 浙江一美容院美白产品汞超标7000

省级医院住院治疗,据说前 20 多天医生都按照普通的肾病综合征用药,但效果不明显。吴女士这种特殊的情况令这家医院的医生疑惑不解,于是他们开始查阅资料,而且还重新...家美容院的小姐妹们,联想到自己平时莫名的神经衰弱、口腔炎症,也担心会不会也是汞在作祟,所以大家纷纷赶到医院做尿汞检测。「就在这个月,我们门诊中已经接到了 20 多例

2023.06.29 跑胶图解|琼脂糖胶和 WB 跑胶经验分享!

文末可领取免费科研入门教学资源跑胶:一个神秘又常见的科研操作。从 PCR 到 WB,跑胶都是极为重要的一步。究竟怎么跑,胶才能又直又稳定呢?这篇经验图解一定能解决你的问题:👉 图文详解琼脂糖胶与 WB 跑胶步骤👉 图文详解琼脂糖胶与 WB 跑胶步骤👉 图文详解琼脂糖胶与 WB 跑胶步骤
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