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2024.07.02 Actin 不灵了?PNAS 告诉你为什么做 WB 一定要跑双内参

✦•✦做 WB 的同学都知道用 Actin 条带作为内参来反映 WB 实验的上样量和结果的可靠性,可你是否知道, Actin 在一些... inhibitors in melanoma 的论文通过大量 WB 「双内参」来精准检测 AMBRA1 和 FAK1 的蛋白表达水平,以确保实验结果的准确性和可重复性

2022.05.31 谁也不想 WB 总出错!配图详解 12 个 WB 翻车原因

实验专用脱脂奶粉。c.洗膜不充分:洗膜按规定来 5min*5 次或 10min*3 次。经验之谈高背景是 WB 实验中最常见的问题,目的条带单一清晰,但其他地方...经常做 western blot 的同学通常会有一种错觉这哪里是搞科研明明是搞「玄学」十个 WB 七个歪八个丑九个坏还有一个不出来要么条带失踪要么背景漆黑要么

2022.04.19 崩溃!磷酸化蛋白 WB 太难了,踩坑无数后我总结了这 7 条

蛋白磷酸化,是蛋白激酶在靶蛋白的氨基酸残基上添加磷酸基团的一种可逆的翻译后修饰,也是信号转导研究绕不开的话题。WB 难,一入 WB 深似海,磷酸化蛋白的 WB...。07 检测总蛋白含量为确定 WB 上信号的缺失是由于磷酸化效率低还是磷酸化蛋白分离不充分,同时需要检测总蛋白含量。例如,使用配对抗体检测磷酸化和未修饰的蛋白

2022.12.01 1小时!讲清 WB 实验的全过程(内含技巧)

常有实验小白抱怨,读了各种 WB 实验技术贴,然而很少有入门级的 WB 操作方法。基于实验小白们的诉求,丁香实验特此整理了一份详细且易懂的 WB 实验操作方法,手把手教小伙伴们理解 WB 实验的全过程。一、实操详解视频如果不方便观看视频,可以先收藏订阅「WB 实验专题」哦,更多实验干货集锦,定期更新!此外,丁香实验

2023.03.12 WB 定量不准确?问题竟然出在内参上!

,用 Stain-Free 信号进行归一化可提高 WB 数据的重现性。(A-C)分别用 dsiRNA 对照和 dsi E3 连接酶转染 BEAS-2B 细胞。裂解产物...师弟上午 10:00求救师姐!我跑 WB 每次蛋白表达趋势咋都跟理论不符呢?选的哪个内参蛋白呀?组织缺氧,选的 GAPDH 做内参,按理目的蛋白表达应该
iWestern 之旅:打开 WB 新世界的大门

2020.09.30 iWestern 之旅:打开 WB 新世界的大门

确保结果准确性和可重复性,达到高水平期刊的要求。iWestern 流程一览3 个多小时就能做完一轮 WB,条带图还很漂亮?是的!来看看 iWestern 方案是如何为 WB 提效的?Step 1 蛋白定量想要把多个样品进行平行比较,测算凝胶上样量,蛋白定量必不可少。BCA 法由于灵敏度高、线性范围宽,均一性和去垢剂

2023.03.13 实验做到崩溃?这 10 个技巧让做出发表级 WB

做了一年多的实验,终于把实验做完了。最近文章也写得差不多了,美滋滋地选选投哪个杂志好点。等师弟把最后的 WB 图发给我就赶紧投稿,今年毕业有望!师兄师弟,WB 结果出来了吗?文章就差你的 WB 图了师弟师兄,你看这个图,感觉又失败了,还要继续摸索体系。师兄实验摸索半个月了,怎么做得还这么烂?师弟唉,检测组织里的蛋白

2024.06.04 WB 内参 β-actin、GAPDH 也会「出错」?这一点千万注意

又是一年毕业季,师兄师姐们都着急给文章找个期刊。忐忐忑忑一个多月,文章终于有了审稿意见。好消息:没被拒,需要修;坏消息:需要修的包括 WB 实验。看似完美的 WB 条带,哪里出了问题?千辛万苦搞定了 WB 条带非特异、背景深、显色过曝……却忽略了内参的问题,甚至差点出现假阳性。除了

2024.05.30 漂亮的 WB 条带就像课题组的好男人,都说有但没人见过,被伤害的硕博生绷不住了......

WB,一个科研界的「神级」实验,拥有着非常独特的品质:神秘、强大、有影响力。神秘:漂亮的 WB 条带就像鬼,人人都说有但是从来没人在实验室里见过。强大:很难被实验技巧所干预,身经百战的科研老司机也会遭遇 WB 的背刺!有影响力:影响范围极其广泛,从研一到博后,甚至导师面对之,也会望而却步。一次 WB 至少 36

2016.01.19 WB 实战指南及正确使用 Quantity One 定量

本人做 WB 有 8、9 年了,略作整理完善拼凑成《WB 实战指南》,欢迎行家批评指正。查看详情>>

2019.03.25 Abcam的分享心得

分享人姓名Abcam邮箱Eric.Xu@abcam.com电话实验版块WB资料概述WB 检测磷酸化蛋白的实验方案分享心得将细胞或组织样品在裂解缓冲液中匀浆... °C,并在一开始就向裂解缓冲液中新鲜加入合适的抑制剂,能够显著减缓这些反应。使用加入了新鲜蛋白酶和磷酸酶抑制剂的 RIPA 或 NP40 缓冲液。具体实验步骤
手把手教你用 PS 做出漂亮的 WB 结果图

2017.02.28 手把手教你用 PS 做出漂亮的 WB 结果图

你是否还在忧愁 western blotting 结果达不到投稿要求?下面的干货一定能帮到你,操作如此之简单,保证你一学就会,做出漂亮的 figures。打开 PS,新建画布(国际标准纸张)。将 WB 曝光原图拖入到画布中,使用参考线将条带摆正。矩形选区选择想要的条带,cltr+单击拖动到另一个新建的空白画布中

2022.12.17 还不会 WB 实验?一文读懂 WB 实验步骤

提起生物医药实验,就不得不提 WB 实验了。WB实验常被科研人称为玄学实验,易学难精。丁香实验在此对 WB 实验进行总结,特地推出「WB 实验」专题,点击下方... 后,即可在曝光机上曝光。更多 WB 实验相关学习内容看过上述实验步骤,科研小白们心里是否有底了呢?丁香实验助力科研,帮大家解决实验中常见问题,让你的科研生涯不孤单

2023.03.24 厄运走开!总结 15 个 WB 离谱条带......

555!WB 仿佛玄学,跑了一周也没出好条带,做梦都是条带糊了......别急别急!WB 需要一生来修炼,师兄这份《WB 15个异常条带分析》表格,可要...「WB 专题」,超全 protocol 经验总结图文不断更新,建议点击收藏!戳此查看 WB专题👇👇👇想看更多实验方法、论文写作指导扫码进入丁香

2023.02.15 WB 实验操作、经验分享汇总(新手指南)

文末可领取免费科研入门教学资源相信很多人在做 WB 实验时,会遇到各式各样奇怪的现象。为了让大家少走弯路,下面就跟大家来分享一下WB 实验过程中会出现哪些现象,是什么原因,如何来解决。WB 实验操作篇WB实验技巧精要操作篇:WB 蛋白样品制备初学者必备的 WB 实验操作图解做好 WB 的 9 个步骤

2023.01.11 WB 实验操作、经验分享汇总(新手指南)

文末可领取免费科研入门教学资源相信很多人在做 WB 实验时,会遇到各式各样奇怪的现象。为了让大家少走弯路,下面就跟大家来分享一下WB 实验过程中会出现哪些现象,是什么原因,如何来解决。WB 实验操作篇WB实验技巧精要操作篇:WB 蛋白样品制备初学者必备的 WB 实验操作图解做好 WB 的 9 个步骤
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