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2023.05.06 5 步搞定! WB 条带灰度测定与作图

文末可领取免费科研入门教学资源在科研中,数据分析与处理,甚至比实验结果图更为重要。在 WB 实验中,条带分析准确性基本可以决定结果是否有意义。丁香实验梳理 5 步法检测实验结果灰度值,让你的数据更加稳定。「进阶」WB 条带如何制图?了解了灰度测定后,就到了最后一步——做出漂亮结果图。虽然我们

2022.05.24 快快快!这样操作 WB 条带真的很漂亮!

WB 实验真的太重要了,但是一天又一天重复做,却次次结果不理想。除了没有拿到组会可以汇报的条带外,基本集齐了所有奇奇怪怪的条带:微笑带,皱眉带,拖尾带,甚至没有条带……为什么论文里别人家的条带都这么好看?实验过程中有哪些问题导致了奇怪的条带?WB 实验有哪些小技巧?为了给大家提供一个交流

2022.04.19 崩溃!磷酸化蛋白 WB 太难了,踩坑无数后我总结了这 7 条

蛋白磷酸化,是蛋白激酶在靶蛋白的氨基酸残基上添加磷酸基团的一种可逆的翻译后修饰,也是信号转导研究绕不开的话题。WB 难,一入 WB 深似海,磷酸化蛋白的 WB...。07 检测总蛋白含量为确定 WB 上信号的缺失是由于磷酸化效率低还是磷酸化蛋白分离不充分,同时需要检测总蛋白含量。例如,使用配对抗体检测磷酸化和未修饰的蛋白

2022.12.01 1小时!讲清 WB 实验的全过程(内含技巧)

常有实验小白抱怨,读了各种 WB 实验技术贴,然而很少有入门级的 WB 操作方法。基于实验小白们的诉求,丁香实验特此整理了一份详细且易懂的 WB 实验操作方法,手把手教小伙伴们理解 WB 实验的全过程。一、实操详解视频如果不方便观看视频,可以先收藏订阅「WB 实验专题」哦,更多实验干货集锦,定期更新!此外,丁香实验

2014.08.14 SuperSW mAb HTP色谱柱在HILIC模式下分离核酸碱基(AN64

SuperSW mAb HTP色谱柱在HILIC模式下分离核酸碱基(AN64
丁香园访世界心脏病联盟前任主席 Mário Maranhão

2015.09.01 丁香园访世界心脏病联盟前任主席 Mário Maranhão

世界心脏病联盟前任主席 Dr. Mário Maranhão 回答了丁香园的提问并表示曾多次来到中国授课。

2022.12.20 免疫荧光有结果 WB 却没条带?问题可能出在这一步

实验室中时常听到这样的困惑,「明明通过免疫荧光(IF)能看到目的蛋白表达在细胞核膜上的表达,但为什么不论用总蛋白还是核蛋白进行 WB 检测,都无法检测到目的蛋白?」类似这样的问题,你是否也深有感触?一、IF & WB免疫荧光(IF)和免疫印迹(WB)都是利用抗原和抗体的

2023.03.12 WB 定量不准确?问题竟然出在内参上!

师弟上午 10:00求救师姐!我跑 WB 每次蛋白表达趋势咋都跟理论不符呢?选的哪个内参蛋白呀?组织缺氧,选的 GAPDH 做内参,按理目的蛋白表达应该...,对实验结果大有影响的,要提前做好功课才行哦我们 WB 蛋白表达结果真的可靠吗?明明大量文献已经报道了目标蛋白的表达情况,但在同样的条件下就是无法重复。一次常规

2014.12.18 美药企药品污染致64人亡14人被捕

并致64人死亡。美国媒体称,这也是美国最严重的一起因药品污染被控的刑事案件。这家名为新英格兰合成药物中心的制药企业由格里高里·科尼利亚罗和巴里·加顿于1998年创办...和印第安纳州最为严重。当时,美国有20个州超过750人患病,其中超过半数感染了一种罕见的真菌性脑膜炎,并导致64人死亡。据称,当时多数人是因背痛注射了该药厂生产的

2022.07.30 WB、ELISA、IHC 的之间的区别与选择?

免疫组化、Western、ELISA,免疫学三大工具,分别用于定位,定性和定量。以下内容来自「WB、ELISA、IHC 」三大专题,提前订阅收藏,每周更新...区别。操作上:需要将抗原或抗体结合到固相载体表面,从而使后来形成的抗原-抗体-酶-底物复合物粘附在载体上,这就是「吸附」的含义。WB 蛋白质印
iWestern 之旅:打开 WB 新世界的大门

2020.09.30 iWestern 之旅:打开 WB 新世界的大门

确保结果准确性和可重复性,达到高水平期刊的要求。iWestern 流程一览3 个多小时就能做完一轮 WB,条带图还很漂亮?是的!来看看 iWestern 方案是如何为 WB 提效的?Step 1 蛋白定量想要把多个样品进行平行比较,测算凝胶上样量,蛋白定量必不可少。BCA 法由于灵敏度高、线性范围宽,均一性和去垢剂

2024.04.23 天哪,什么 WB 片子竟让我眼前一黑(内含福利)

一入 WB 深似海,看似基础又常见的实验,却总是一遍遍挑战科研人的心态!瞧,这会师弟又对着他那一张黑乎乎、条带朦朦胧胧的片子,唉声叹气......作为大师姐,一番了解后推测可能是目的蛋白表达丰度太低,曝光时间把控不当造成背景信号太强,建议尝试高效提取富集蛋白、选用高灵敏度的 ECL 发光液,调整曝光时间等。当然

2023.05.15 3 步!小分子量蛋白,跑出漂亮 WB

小分子蛋白真的很神秘,可能跑 30 次,才能现身一次。究竟怎么做小分子蛋白 WB 才能让它们「现身」,这份经典攻略请收下:「进阶」条带弱的其他原因其实小分子蛋白 WB 经常失败,主要会体现在:没有条带或者条带弱,我们总结了两种结果原因盘点与建议:01、没有条带原因盘点抗体染色不充分:建议增加抗体浓度,延长孵育时间

2022.03.26 转膜又失败了?条带参差不齐?这些 WB 实验问题,盘它!

WB 已然成为蛋白实验中的「大众情人」技术,但就是这样一个初级又常用的实验,却会出现各种稀奇古怪的问题。大师兄从丁香实验的问答广场上,筛选了几个高频出现的共性问题,来看看你中招没是不是戳中了大部分苦于 WB 久矣实验人的心脏,没关系!这一次,你的实验问题,有人解答,还能拿奖!做WB 实验、蛋白质组学、免疫

2023.08.10 WB 又跑歪了!4 个跑歪案例一次说清

点此领免费科研入门教学资源相信很多人在做 Western blot 实验时,会遇到各式各样的条带。很多条带在跑胶的过程中就已经歪了。本文汇总 WB 跑歪案例...孵育抗体。更多内容,点击图片后即可查看以上就是 WB 跑胶条带异常结果解读。如果你是实验小白可以收藏、转发文章,在做实验的时候按照流程一步步操作。如果你是师兄师姐

2022.05.10 「它」笑了,我哭了,做 WB 怎么这么难呀?

科研人最怕见到的两种微笑,一个是 ddl 前导师脸上关心的微笑,还有一个是 WB 条带上出现的微笑。图片来源:丁香园论坛比如上方右侧图片中的这一个个微笑,看着让人难过。如果你经常出现微笑条带,那么最好在制胶的过程中多点耐心,保证凝固均匀大概率就能避免。除了微笑条带外,WB 的翻车情况还有很多,让人防不胜防,有诗为证
O型血III期结肠癌更易发生化疗后血小板减少?

2014.12.11 O型血III期结肠癌更易发生化疗后血小板减少?

人发生过CIT,与未发生CIT的病人进行了人口统计学、临床特征、实验室指标和病理学特征进行了比较(具体见表)。在这项研究中,41%病人有O型血,O型血病人当中CIT发生率明显高于其他血型,且O型血与性别明显相关,主要存在于男性;O型血还与淋巴血管侵犯明显相关;与组织病理学分级也明显相关,主要和中高级组织学分级明显相关

2023.10.14 黑斑、笑脸、重影、拖尾......盘点 18 种 WB 异常条带问题

WB 的苦每个科研人都吃过——特种兵式配胶、电泳、转膜、敷抗体,最后却迎来拆盲盒式的条带曝光,18 种异常条带真的会随即出现,即使完全按照 protocol 也不一定能做出正常结果,为此科研人自创 WB 玄学一词!但如果抽丝剥茧,究其原因,会发现 WB 玄学离不开以下 2 个「主要嫌犯」:嫌犯

2022.11.18 这些本科生,发了 64 篇 SCI ......

发论文的现象越来越常见了。最近湘雅医学院发表了这样一篇论文,给本科医学生安排导师后,他们的科研水平会发生什么变化?他们发表了 64 篇 SCI最近一篇名为「本科生... 项,参与发表 SCI 论文 87 篇,其中本人为第一、二作者的有 64 篇,累计影响因子高达 320 分。与 C 组相比,A 组和 B 组学生以第一作者
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