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2023.05.29 20 个蛋白 WB 转膜的条件摸索经验分享

WB 堪称基础分子实验中的「玄学」,其中常见问题和注意事项真的太多,一不小心就会翻车。以下常见问题可供排查。Q:没有阳性条带怎么办?A:可能是以下几个原因抗体...点此领免费科研入门教学资源WB 经常出现实验结果不如意的情况,除了抗体原因,转膜恐怕是 western blot 成败的最关键因素。本文总结了 20 个分子量

2022.04.19 崩溃!磷酸化蛋白 WB 太难了,踩坑无数后我总结了这 7 条

蛋白磷酸化,是蛋白激酶在靶蛋白的氨基酸残基上添加磷酸基团的一种可逆的翻译后修饰,也是信号转导研究绕不开的话题。WB 难,一入 WB 深似海,磷酸化蛋白的 WB...。07 检测总蛋白含量为确定 WB 上信号的缺失是由于磷酸化效率低还是磷酸化蛋白分离不充分,同时需要检测总蛋白含量。例如,使用配对抗体检测磷酸化和未修饰的蛋白

2022.12.01 1小时!讲清 WB 实验的全过程(内含技巧)

常有实验小白抱怨,读了各种 WB 实验技术贴,然而很少有入门级的 WB 操作方法。基于实验小白们的诉求,丁香实验特此整理了一份详细且易懂的 WB 实验操作方法,手把手教小伙伴们理解 WB 实验的全过程。一、实操详解视频如果不方便观看视频,可以先收藏订阅「WB 实验专题」哦,更多实验干货集锦,定期更新!此外,丁香实验

2023.03.12 WB 定量不准确?问题竟然出在内参上!

,用 Stain-Free 信号进行归一化可提高 WB 数据的重现性。(A-C)分别用 dsiRNA 对照和 dsi E3 连接酶转染 BEAS-2B 细胞。裂解产物...师弟上午 10:00求救师姐!我跑 WB 每次蛋白表达趋势咋都跟理论不符呢?选的哪个内参蛋白呀?组织缺氧,选的 GAPDH 做内参,按理目的蛋白表达应该
iWestern 之旅:打开 WB 新世界的大门

2020.09.30 iWestern 之旅:打开 WB 新世界的大门

确保结果准确性和可重复性,达到高水平期刊的要求。iWestern 流程一览3 个多小时就能做完一轮 WB,条带图还很漂亮?是的!来看看 iWestern 方案是如何为 WB 提效的?Step 1 蛋白定量想要把多个样品进行平行比较,测算凝胶上样量,蛋白定量必不可少。BCA 法由于灵敏度高、线性范围宽,均一性和去垢剂
白细胞介素-37 (IL-37/IL-1F7)

2017.09.03 白细胞介素-37 (IL-37/IL-1F7)

白细胞介素 (IL)-37 是 IL-1 家族的新成员,共有五种不同亚型 (IL-37a-e),目前研究表明只有 IL-37b 具有生物学功能并在多种疾病...:IL-37 在细胞内翻译成长的前体蛋白, 之后在炎症刺激下被切断并释放。IL-1F7 有五种不同的剪接亚型(IL-1Fa-e),IL-1F7a 的 N 末端

2024.09.04 读到即是福气 | 掌握 5 点 WB 制胶不再出错(免费试用)

离大谱,折腾两天做的 WB,看到显影结果的那一刻,人都麻了……这歪七扭八的条带,仿佛是在嘲笑我(文中有免费试用)。别人做的:我做的:为什么会出现这种结果?最大的可能是 WB 胶不均匀。你在 WB 制胶过程中是否也遇到这样或那样的问题呢,这里为你送上一份制胶 Tips!▲上下滑动查看▼1.

2023.03.13 实验做到崩溃?这 10 个技巧让做出发表级 WB

做了一年多的实验,终于把实验做完了。最近文章也写得差不多了,美滋滋地选选投哪个杂志好点。等师弟把最后的 WB 图发给我就赶紧投稿,今年毕业有望!师兄师弟,WB 结果出来了吗?文章就差你的 WB 图了师弟师兄,你看这个图,感觉又失败了,还要继续摸索体系。师兄实验摸索半个月了,怎么做得还这么烂?师弟唉,检测组织里的蛋白

2022.12.06 半小时,讲清 WB 实验鉴定外泌体!(值得收藏)

和大家一起学习,采用 WB 实验鉴定外泌体的关键步骤。一、外泌体是什么?外泌体是直径约为 30-200nm,密度在 1.13-1.21g/mL 的小囊泡,其天然...待测样品 25μL 加入到 96 孔板中;取 200μL 的 BCA 工作液于 96 孔板中,37° 孵育 30 min;多功能酶标仪测定

2024.08.15 WB 条带还能「找黄牛」,200 元一套,导师:你试下就可以退学了

最近,论文黑工厂又生「妙招」—— 既然整个论文代写代发抓得严,那我把 figure 拆开卖吧!图源:网络一条网上的热帖,关于 WB...得清真假 WB。图源:网络而购买的用户也真不少,不禁让人后背发凉。其中一款热门商品,因为价格低廉(200 元),竟然已售 4000 份。相信每一个开组会的人都没必要斥巨资

2024.06.04 WB 内参 β-actin、GAPDH 也会「出错」?这一点千万注意

又是一年毕业季,师兄师姐们都着急给文章找个期刊。忐忐忑忑一个多月,文章终于有了审稿意见。好消息:没被拒,需要修;坏消息:需要修的包括 WB 实验。看似完美的 WB 条带,哪里出了问题?千辛万苦搞定了 WB 条带非特异、背景深、显色过曝……却忽略了内参的问题,甚至差点出现假阳性。除了
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