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2022.12.03 收藏!如何制备 WB 实验的样品(内含技巧)?

每一个生物医学科研工作者都有一部 WB 实验血泪史,相信做 WB 的人都知道每个步骤都涉及到实验成败。在此丁香实验针对不同样品性质,整理了 3 种制备 WB 实验样品的高效方法,助力小伙伴们科研不迷路!以下所有内容都收录在「WB 实验专题」之中,大家也可以提前收藏订阅一波,内容更新不错过!一、单层贴壁细胞总蛋白的提取

2023.05.07 不藏了!WB 终极技巧:得此十一条,可稳条带!

不知道以上崩溃瞬间你中了几条,文章底部留言,分享你做 WB 的崩溃瞬间吧~本来 WB 流程就比较繁琐,不断失败与重复中,无力感更是会反复循环,一个小小的实验...影响到最终的实验数据质量。为了保住各位本就余量不多的头发(这是在阴阳谁?!),我们特备了关于电泳和转印环节的 11 条 Tips,让大家在 WB 实验中乘风破浪
王从容:NOS1AP及G6PC2 常见变异与糖尿病相关性

2008.12.02 王从容:NOS1AP及G6PC2 常见变异与糖尿病相关性

Congrong Wang: Association of Common Variants in the NOS1AP and G6PC2 Region with Type 2 Diabetes in the Chinese Population(王从容:NOS1AP及G6PC2 常见变异与糖尿病相关性)

2022.12.23 WB 实验背景很脏是什么原因?该如何解决?

Western Blot 实验可以说是生物专业最基础的实验了,然而 WB 实验天天做,但是正常高清的结果图却不是你想有就能有。WB 实验出现最多问题的,应该...不宜过长,一般是室温下摇床孵育 1 到 2 小时,抗体孵育完成后要清洗干净,特别是二抗孵育完成后,否则可能导致显影结果出现高背景。6、发光液配置大部分实验室使用的

2024.07.02 Actin 不灵了?PNAS 告诉你为什么做 WB 一定要跑双内参

✦•✦做 WB 的同学都知道用 Actin 条带作为内参来反映 WB 实验的上样量和结果的可靠性,可你是否知道, Actin 在一些... inhibitors in melanoma 的论文通过大量 WB 「双内参」来精准检测 AMBRA1 和 FAK1 的蛋白表达水平,以确保实验结果的准确性和可重复性

2024.07.11 师姐的史诗级 WB 结果图,竟然不用转膜?

呀?师弟师姐如果还不行,我教你一条「WB 捷径」,凝胶扔了,也别转膜,用这个实验,30 个样本,5、6 个小时就出结果。这是啥方法?师姐你快讲讲!师弟一种不提... WB 通常需要 7~25 小时,最多一块胶跑 24 个样品,但 In-Cell Western 可以在 5~6 小时内完成最多 384 个样品。02、ICW

2022.05.31 谁也不想 WB 总出错!配图详解 12 个 WB 翻车原因

经常做 western blot 的同学通常会有一种错觉这哪里是搞科研明明是搞「玄学」十个 WB 七个歪八个丑九个坏还有一个不出来要么条带失踪要么背景漆黑要么杂带丛生……有时就算凑齐天时地利人和也不一定能得到一组完美条带江湖传言:一个生物学博士,要跑满 1000 板胶才有可能毕业WB 实验

2022.04.19 崩溃!磷酸化蛋白 WB 太难了,踩坑无数后我总结了这 7 条

蛋白磷酸化,是蛋白激酶在靶蛋白的氨基酸残基上添加磷酸基团的一种可逆的翻译后修饰,也是信号转导研究绕不开的话题。WB 难,一入 WB 深似海,磷酸化蛋白的 WB...。07 检测总蛋白含量为确定 WB 上信号的缺失是由于磷酸化效率低还是磷酸化蛋白分离不充分,同时需要检测总蛋白含量。例如,使用配对抗体检测磷酸化和未修饰的蛋白

2022.12.01 1小时!讲清 WB 实验的全过程(内含技巧)

常有实验小白抱怨,读了各种 WB 实验技术贴,然而很少有入门级的 WB 操作方法。基于实验小白们的诉求,丁香实验特此整理了一份详细且易懂的 WB 实验操作方法,手把手教小伙伴们理解 WB 实验的全过程。一、实操详解视频如果不方便观看视频,可以先收藏订阅「WB 实验专题」哦,更多实验干货集锦,定期更新!此外,丁香实验
死亡病例:头孢拉定 6 g qd 错在哪?

2016.10.09 死亡病例:头孢拉定 6 g qd 错在哪?

「脚步」,从一个案例引发的抗菌药物使用讨论开始吧……病历重现患者,男性,胆囊炎术后出现发热,医生予以头孢拉定 6 g qd 治疗一周,患者出现休克...抗菌后效应(PAE)很短,疗效取决于有效血药浓度的持续时间,案例中给药方案是 6 g qd,头孢拉定的半衰期是一个小时左右,单次给药无法维持足够长时间的有效
死亡病例重现:头孢拉定 6 g qd,错在哪?

2018.09.14 死亡病例重现:头孢拉定 6 g qd,错在哪?

病例重现:男性患者,胆囊炎术后出现发热,医生给予头孢拉定 6 g qd 治疗一周,患者出现休克,肾功能损害,最终死亡。问医生错在哪里?是否因为抗菌药物...感染等,并不能覆盖引起胆囊炎的病原菌。错二:头孢拉定 6 g qd,用法用量不当1. 时间依赖性抗菌药医生给予头孢拉定 6 g qd ,先不说其选药不当,该药的
iWestern 之旅:打开 WB 新世界的大门

2020.09.30 iWestern 之旅:打开 WB 新世界的大门

(可在桌面和基于云的版本中使用)直接在 iBright 上执行光密度测定,定量和归一化Step 6 归一化想分析和比较蛋白表达量,就需要进行定量 WB;想让定量...确保结果准确性和可重复性,达到高水平期刊的要求。iWestern 流程一览3 个多小时就能做完一轮 WB,条带图还很漂亮?是的!来看看 iWestern 方案

2023.03.12 WB 定量不准确?问题竟然出在内参上!

师弟上午 10:00求救师姐!我跑 WB 每次蛋白表达趋势咋都跟理论不符呢?选的哪个内参蛋白呀?组织缺氧,选的 GAPDH 做内参,按理目的蛋白表达应该...,对实验结果大有影响的,要提前做好功课才行哦我们 WB 蛋白表达结果真的可靠吗?明明大量文献已经报道了目标蛋白的表达情况,但在同样的条件下就是无法重复。一次常规

2022.03.26 转膜又失败了?条带参差不齐?这些 WB 实验问题,盘它!

WB 已然成为蛋白实验中的「大众情人」技术,但就是这样一个初级又常用的实验,却会出现各种稀奇古怪的问题。大师兄从丁香实验的问答广场上,筛选了几个高频出现的共性问题,来看看你中招没是不是戳中了大部分苦于 WB 久矣实验人的心脏,没关系!这一次,你的实验问题,有人解答,还能拿奖!做WB 实验、蛋白质组学、免疫
如何实现 20 合一混检?华大智造 MGISTP-7000 给出答案

2022.01.21 如何实现 20 合一混检?华大智造 MGISTP-7000 给出答案

提升核酸检测的效率及能力。而这也对自动化分杯工作带来通量、效率和成功率等方面的新挑战。借「自定义转移」功能MGISTP-7000 可实现「20 合 1」混检为响应国家抗疫的最新要求,快速完成大规模人群的核酸检测工作,华大智造基于近两年的一线抗疫经验,依托全自动 MGISTP-7000 分杯处理系统紧急推出「20 合一」混检
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