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2022.12.23 WB 实验背景很脏是什么原因?该如何解决?

Western Blot 实验可以说是生物专业最基础的实验了,然而 WB 实验天天做,但是正常高清的结果图却不是你想有就能有。WB 实验出现最多问题的,应该... ECL 发光液,A 液和 B 液按照 1:1 的比例配置;发光液要求现用现配,每次根据使用量合理配置用液量;发光液配置时间过长同样会引起发光效果不好,背景脏

2024.07.02 Actin 不灵了?PNAS 告诉你为什么做 WB 一定要跑双内参

✦•✦做 WB 的同学都知道用 Actin 条带作为内参来反映 WB 实验的上样量和结果的可靠性,可你是否知道, Actin 在一些... inhibitors in melanoma 的论文通过大量 WB 「双内参」来精准检测 AMBRA1 和 FAK1 的蛋白表达水平,以确保实验结果的准确性和可重复性

2024.07.11 师姐的史诗级 WB 结果图,竟然不用转膜?

师弟最近在狂补WB 结果,但面对 200 Kda 蛋白这座大山,结果图却一次比一次糊——「弥散、模糊、背景过高」没有一个图能用上。组会上师姐紧急支了 5 招:师姐一般来说,通过细致调整上述参数,可以有效改善 WB 转模糊的问题,提高实验结果的清晰度和特异性。谢谢师姐,但是电压

2022.12.19 速查收!15 年 WB 经验教你科研不迷路(视频教学)

科研人习惯把 WB 叫做「玄学」,一不小心很容易出现问题!明明上了两个相同体积的同个样品,可总是这两个泳道的条带趋势不一致。我们给大家准备了图解 WB 标准... 清洗三次。暗室显影:加入和二抗结合的 AB 液,在发光仪中显色。三、WB实验注意事项1. 电转液需要提前遇冷;2. 电转的过程中的电流不能过高;3. 孵育抗体的

2022.05.31 谁也不想 WB 总出错!配图详解 12 个 WB 翻车原因

经常做 western blot 的同学通常会有一种错觉这哪里是搞科研明明是搞「玄学」十个 WB 七个歪八个丑九个坏还有一个不出来要么条带失踪要么背景漆黑要么杂带丛生……有时就算凑齐天时地利人和也不一定能得到一组完美条带江湖传言:一个生物学博士,要跑满 1000 板胶才有可能毕业WB 实验

2022.04.19 崩溃!磷酸化蛋白 WB 太难了,踩坑无数后我总结了这 7 条

蛋白磷酸化,是蛋白激酶在靶蛋白的氨基酸残基上添加磷酸基团的一种可逆的翻译后修饰,也是信号转导研究绕不开的话题。WB 难,一入 WB 深似海,磷酸化蛋白的 WB...。07 检测总蛋白含量为确定 WB 上信号的缺失是由于磷酸化效率低还是磷酸化蛋白分离不充分,同时需要检测总蛋白含量。例如,使用配对抗体检测磷酸化和未修饰的蛋白

2023.05.29 20 个蛋白 WB 转膜的条件摸索经验分享

WB 堪称基础分子实验中的「玄学」,其中常见问题和注意事项真的太多,一不小心就会翻车。以下常见问题可供排查。Q:没有阳性条带怎么办?A:可能是以下几个原因抗体...点此领免费科研入门教学资源WB 经常出现实验结果不如意的情况,除了抗体原因,转膜恐怕是 western blot 成败的最关键因素。本文总结了 20 个分子量

2022.12.01 1小时!讲清 WB 实验的全过程(内含技巧)

常有实验小白抱怨,读了各种 WB 实验技术贴,然而很少有入门级的 WB 操作方法。基于实验小白们的诉求,丁香实验特此整理了一份详细且易懂的 WB 实验操作方法,手把手教小伙伴们理解 WB 实验的全过程。一、实操详解视频如果不方便观看视频,可以先收藏订阅「WB 实验专题」哦,更多实验干货集锦,定期更新!此外,丁香实验

2023.03.12 WB 定量不准确?问题竟然出在内参上!

,用 Stain-Free 信号进行归一化可提高 WB 数据的重现性。(A-C)分别用 dsiRNA 对照和 dsi E3 连接酶转染 BEAS-2B 细胞。裂解产物...师弟上午 10:00求救师姐!我跑 WB 每次蛋白表达趋势咋都跟理论不符呢?选的哪个内参蛋白呀?组织缺氧,选的 GAPDH 做内参,按理目的蛋白表达应该

2024.05.21 IHC、ELISA、WB 怎么选?一文速通(含 0 元试用)

IHC、ELISA、WB,是免疫学三大常用工具,分别用于蛋白质的定位,定性和定量分析。我们整理了这三者之间的区别、使用场景,文末还有 wb 试用产品推荐~「研选干货」IHC、ELISA、WB 选择要点省时省力版👇图源:自制IHC原理:融合了免疫学原理(抗原抗体特异性结合)和组织学技术(组织的取材、固定

2023.03.13 实验做到崩溃?这 10 个技巧让做出发表级 WB

做了一年多的实验,终于把实验做完了。最近文章也写得差不多了,美滋滋地选选投哪个杂志好点。等师弟把最后的 WB 图发给我就赶紧投稿,今年毕业有望!师兄师弟,WB 结果出来了吗?文章就差你的 WB 图了师弟师兄,你看这个图,感觉又失败了,还要继续摸索体系。师兄实验摸索半个月了,怎么做得还这么烂?师弟唉,检测组织里的蛋白
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