林建华, 黄宇
福建医科大学附属第一医院骨科
目的 克隆人肿瘤转移抑制基因KiSS-1，利用基因重组技术，构建人KiSS-1 基因腺相关病毒载体，为进一步研究骨肉瘤的基因治疗建立一个平台。
方法 从人正常胎盘组织中提取总RNA，RT-PCR 获取KiSS-1基因（ORF ） cDNA 序列，并将其克隆至腺相关病毒载体pAAV-MCS，构建人KiSS-1 基因腺相关病毒载体。
结果 人胎盘组织抽提总RNA，并通过RT-PCR 获得目的基因ORF，经TA 克隆后，将目的基因连入pAAV-MCS 中，送测序结果无误。
结论 成功构建的重组质粒*pAAV-MCS-KiSS-1，将为进一步研究该基因的蛋白表达提供基础，为骨肉瘤的基因治疗提供实验依据。
